Серологический анализ крови для диагностики инфекций: что показывает, расшифровка

0

Серологический анализ крови

Серологический анализ крови назначают в различных областях медицины. В гинекологии, венерологии – для обнаружения заболеваний, передающихся половым путем, в педиатрии – для выявления  детских болезней (краснуха, корь и др.), в гастроэнтерологии – чаще для подтверждения вирусного гепатита. Инфекционисты, терапевты назначают серологическое исследование при подозрении на любые вирусные, инфекционные заболевания.

Что такое серология

Раздел иммунологии, который занимается изучением взаимодействия антигенов (Аг) с антителами (Ат) сыворотки крови, называется серологией. Исследования могут проводить в пробирке с использованием биологического материала пациента или в организме лабораторных животных после их заражения. При проникновении в организм человека вирусных, инфекционных, паразитарных возбудителей иммунная система синтезирует против них антитела (белковые соединения). Возбудители заболеваний продуцируют антигены (чужеродное вещество).

Серологические исследования направлены на выявление антигенов, антител, которые точно укажут на наличие или отсутствие заболевания. По уровню белковых соединений можно определить фазу болезни, ее течение, эффективность лечебных мероприятий. С помощью серологии выявляют гормональные нарушения, аутоиммунные болезни, при которых собственные клетки организма воспринимаются как чужеродные.

Для борьбы с болезнетворными агентами организм выделяет определенные белки – для каждого возбудителя определенный тип. Белковые соединения и чужеродный материал подходят друг другу как ключ к замку, при их соединении образуется комплекс, который выпадает в осадок в пробирке. В результате в однородной сыворотке появляется осадок, хлопья или она мутнеет.

Важно! 

С помощью серологических исследований определяют группу крови, резус-фактор, подтверждают отцовство, выявляют источник инфекционных болезней при эпидемиях.

Виды иммуноглобулинов в исследовании

При внедрении  любого возбудителя болезни в организм, включая паразитов, аллергены в ответ вырабатываются защитные белки – иммуноглобулины. Их виды различны по специфическим функциям, способности связываться с определенными антигенами, скорости реакции на проникновение патогенной флоры, прочности связи с болезнетворным агентом. Виды иммуноглобулинов:

  1. G – имеют противовирусную, антибактериальную активность. Появляются в крови, при длительном нахождении возбудителя в организме или его повторном проникновении. Присутствуют в сосудистом русле и за его пределами.
  2. М – первые синтезируются, если возбудитель попал в кровь. Запускает каскад защитных реакций, чтобы привлечь другие иммуноглобулины, лимфоцитарные клетки.
  3. А – имеют 2 вида: сывороточные, секреторные. Первые содержатся в крови, вторые в слюне, слезе, грудном молоке, пищеварительном, дыхательном тракте. Препятствуют проникновению болезнетворной флоры в организм, ликвидируя их в полости рта, носа, пищеварительном тракте, бронхах.
  4. Е – участники иммунного ответа при проникновении в организм паразитов (гельминтов). Главные иммуноглобулины, которые отражают аллергические реакции немедленного типа.
  5. D – малоизученная группа иммуноглобулинов, появляются в крови при хронических воспалениях.

Во время серодиагностики инфекционных заболеваний наибольшее значение имеет уровень иммуноглобулинов М, А, G.

Показания к выполнению

Исследования проводят беременным для определения резус-конфликта между матерью и плодом, выявления ТОRСН инфекций – группа заболеваний, которые представляют особую опасность для плода:

  1. Т – токсоплазмоз.
  2. О – другие болезни: эпидемический паротит, сифилис, гепатит А, B, корь, энтеровирусные, папилломавирусные болезни, хламидиоз и др.
  3. R – краснуха.
  4. С – цитомегаловирусная инфекция.
  5. Н – герпесвирусная инфекция.

Всем новорожденным в обязательном порядке исследование проводят для определения врожденных болезней. Общие показания для анализа у взрослых и детей:

  • гормональные нарушения;
  • аллергические реакции;
  • аутоиммунные заболевания;
  • подозрение на вирусные, паразитарные, бактериальные болезни;
  • онкология;
  • определение стадии болезни;
  • нарушение обменного процесса;
  • бесплодие;
  • определение групповой принадлежности, резус-фактора;
  • эффективность вакцинации, медикаментозной терапии;
  • изучение состояния защитных факторов организма – иммунный статус;
  • патологии при беременности;
  • выявление реактивного фактора;
  • определение степени родства.

Серологическую диагностику могут назначить до и после хирургического лечения с целью оценки количества определенных видов антител.

Плюсы, минусы серологических исследований

С помощью серодиагности проводят географический скрининг, массовую диагностику с профилактической целью для предупреждения эпидемий. Другие плюсы:

  • высокая достоверность;
  • быстрая расшифровка результатов – в течение 1 суток;
  • большой список выявляемых заболеваний;
  • безопасность анализа;
  • возможность контролировать эффективность лечения по титру Аг, Ат.

Минус метода в том, что при проведении нужно учитывать инкубационный период болезни. У некоторых инфекционных заболеваний есть период «серологического окна» – вирус в организме есть, но антитела еще в кровь не поступили. Обнаружить вирус герпеса можно через 2 недели, ВИЧ – через 1, 3, 6 месяцев после заражения.

Важно! 

Если верить статистике, ошибочные результаты составляют 4% от общего числа проведенных анализов. Чаще это связано с несоблюдением правил подготовки к анализу, нарушением правил проведения диагностики.

Подготовка к исследованию

Чаще биологическим материалом служит кровь, реже слюна, кал, моча, срезы тканей, альвеолярные смывы, спинномозговая, амниотическая жидкости. Серологические исследования включают в себя множество методов выявления возбудителей, от этого зависят определенные правила подготовки. Общие рекомендации перед серологическими тестами:

  • последний прием пищи за 9-12 часов;
  • за 24 часа ограничить употребление жирной, жареной, соленой, острой пищи, алкогольных напитков;
  • в день сдачи крови нельзя есть, разрешено пить обычную негазированную воду;
  • по возможности не курить за 10 часов до сдачи;
  • прекратить прием любых лекарственных препаратов, в том числе витаминов. Если медикаменты назначены на постоянной основе и прекратить прием нельзя, предупредить врача;
  • за 24 часа избегать стресса, исключить физические нагрузки.

Желательно, чтобы перед сдачей человек находился в спокойном состоянии, так как при любых эмоциональных проявлениях в кровь выделяются гормональные вещества, белки (кортизол, адреналин, норадреналин и др.). Если назначены инструментальные методы диагностики, то в первую очередь сдают кровь, чтобы последующие обследования не повлияли на результат анализа.

Методы серологических исследований

Способов проведения диагностики множество, как и заболеваний, которые они выявляют. Наиболее значимые:

  1. Агглютинация.
  2. Преципитация
  3. Гемагглютинация.
  4. Торможение гемагглютинации.
  5. Непрямая реакция Кумбса.
  6. Коагглютинация.
  7. Преципитация.
  8. Двойная радиальная иммунодиффузия.
  9. Реакция связывания комплемента (РСК).
  10. Иммунофлюоресценция (РИФ).
  11. Иммуноферментный метод (ИФА).
  12. Нейтрализация.

Чаще всего в лабораториях применяют ИФА, РИФ, РСК, реакции агглютинации.

Иммунофлюоресцентный метод (РИФ)

Для проведения исследования необходим биологический материал пациента, люминесцирующая жидкость. Второй компонент содержит антитела к предполагаемому возбудителю заболевания, которые помечены флуоресцеинизотиоционатом.

Виды РИФ:

  1. Прямой – материал пациента смешивают с мечеными антителами, если это срез ткани, обрабатывают его поверхность. Если возбудитель присутствует, образуется светящийся комплекс.
  2. Непрямой – проводят в 2 этапа. На первом в сыворотку или другой материал добавляют немеченые (первые) антитела. На втором вводят меченые (вторые) антитела против первых.

Полученные комплексы исследуют под люминесцентным, оптическим микроскопом ручным способом или автоматическим с помощью микрочипового цитометра. Из-за флуоресцентного вещества комплексы при затемнении излучают зеленое свечение, яркость которого отмечают плюсами от 1 до 4. Чем меньше плюсов, тем меньше комплексов с возбудителем заболевания.

Иммуноферментный метод

Как и РИФ, основан на маркировке чужеродного материала или белковых иммунных компонентов. В качестве маркировочного вещества выступают различные ферменты, которые имеют высокую специфичность, умеренную каталитическую активность, стабильность при образовании комплексов. Методы ИФА: гомогенные, гетерогенные. При первых все реакции происходят в жидком растворе. При вторых реакции проводят при участии твердого носителя.

Суть ИФА заключается в образовании комплексов иммунных белков человека с чужеродными антигенами сначала в жидком растворе, затем на твердой фазе. Под ней подразумевают прикрепление антигенов, антител к стенкам лунок полистиролового микропланшета. То есть после смешивания материала пациента с антителами против возбудителя смесь переносят на поверхность с лунками, куда прикрепляются антитела, антигены. Дальше изучают состав материала.

Реакция связывания комплимента

Для исследования необходимы: кровь или другой материал пациента, сыворотка с антителами, комплимент. Сначала смешивают кровь с сывороткой – образуется комплекс. После добавляют комплимент, который связывается с комплексом. Если связи между антиген-антитело не образуется, то комплемент остается в свободном, несвязанном состоянии. Чтобы определить его состояние в исследуемой жидкости, добавляют гемолитическую смесь (эритроциты барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент свободен, он соединяется с гемолитической смесью – реакция отрицательная, возбудитель не обнаружен.

Реакции, связанные с агглютинацией

Самые простые серологические реакции – с применением антибактериальной сыворотки. Исследуемую кровь пациента смешивают при комнатной температуре с различными сыворотками определенной концентрации. Результат оценивают по концентрации сыворотки, при которой произошла агглютинация. С помощью агглютинации определяют группу крови, резус-факторы.

Важно! 

Распространенным методом серологической диагностики являются реакции, основанные на феномене преципитации: иммуноэлектрофорез, иммунодиффузия и др.

Какие заболевания выявляет анализ

Чтобы выявить заболевание при помощи серологических методов, необходимы предположения о возбудителе на основании клинической картины, жалоб. Так как для каждого возбудителя есть свои антитела, невозможно провести анализ, выявляющий сразу всех болезнетворных агентов, которые могут быть в организме, если нет предварительного диагноза. Например, если человеку ставят предварительный диагноз вирусный гепатит, то при исследовании применяют сыворотку с антителами против гепатита. Выявляемые болезни, возбудители:

  • вирусные гепатиты;
  • краснуха;
  • сифилис;
  • паротит;
  • ВИЧ;
  • коклюш;
  • корь;
  • аутоиммунные заболевания;
  • герпес;
  • вирус Эпштейн-Барр, клещевого энцефалита, ветряной оспы;
  • хламидии;
  • лямблии;
  • цитомегаловирус;
  • парвовирус;
  • токсоплазмы;
  • хеликобактер;
  • легионеллы;
  • микоплазмы;
  • уреаплазмы;
  • лямблии;
  • гельминты;
  • боррелии и др.
Вирусные гепатиты

С помощью исследования выявляют любую болезнь, при которой в кровь выделяется чужеродные антигены.

Расшифровка результатов

Результаты анализов расшифровывают от 2 до 24 часов. При обнаружении в материале пациента антигенов возбудителя – результат положительный, если при добавлении в кровь антител против определенного возбудителя не образуется комплекс антитело-антиген – результат отрицательный. После выявления чужеродного белка определяют количество антител, которые связались с антигенами, чтобы определить течение, тяжесть заболевания, в бланках анализа это отмечают плюсами от 1 до 4.

При диагностике возможны ложные результаты, если исследование проведено в период «серологического окна» заболевания или нарушены правила подготовки к сдаче, выполнения исследования. При положительном результате назначают повторный анализ. При подозрении на сифилис, ВИЧ, гепатит положительный результат можно получить не меньше чем через 2 недели после контакта с инфицированным.

После постановки диагноза, назначении лечения через 2-3 недели снова берут анализ, чтобы определить титр (количество) антител. Если он нарастает –  заболевание прогрессирует, количество возбудителей в организме повышается, терапия требует коррекции. Серологическая диагностика при аллергических реакциях направлена на определение иммуноглобулинов Е, которые будут прикреплены к форменных элементам в анализе крови.

Важно! 

Параллельно с серологической диагностикой туберкулеза, бруцеллеза, туляремии проводят кожно-аллергические пробы.

Оценка иммунного статуса

Для определения иммунного статуса учитывают специфический, неспецифический иммунитет в целом. При помощи серологических методов определяют уровень всех иммуноглобулинов, активность, уровень Т, В-лимфоцитов, включая их подкасты. Оценку статуса проводят в 2 этапа. На первом (клиническом) в бланке отмечают: как часто человек болеет инфекционными заболеваниями, сопровождаются ли они осложнениями, как долго поддаются медикаментозному лечению, есть ли хронические заболевания.

Второй этап включает в себя 2 вида тестов. В первый входит определение количества всех иммуноглобулинов, Т, В-лимфоцитов. При выявлении отклонений иммунитета от нормы переходят ко второму (глубокому) тесту, чтобы определить причину нарушения защитных сил организма. Определяют все субпопуляции Т, В-лимфоцитов. Второй тест – процесс трудоемкий, выполнение может занять до 10 дней.

При помощи серологических исследований выявляют огромное количество заболеваний, при которых в кровь выделяются чужеродные компоненты. Способов серодиагностики множество, все они имеют высокую эффективность. Изучение уровня иммуноглобулинов помогает оценить восприимчивость организма к определенным инфекциям для проведения прививочных мероприятий и других профилактических мер.

Логотип сайта KrovInfo.com

Увы, комментариев пока нет. Станьте первым!

Добавить комментарий

Данные не разглашаются