Определение количества гемоглобина по методу сали

Метод определения концентрации гемоглобина по Сали практически не используется в современных лабораториях. Он требует больших временных затрат и дает неточные результаты. Но метод Сали все еще эффективен в условиях ограниченного доступа к современной технике. Например, при отсутствии электроэнергии, расходных материалов или при поломке автоматического исследовательского оборудования.

Принцип проведения исследования

В основе метода Сали лежит простая реакция преобразования гемоглобина. Для этого в препарат крови добавляется определенное количество хлористоводородной кислоты. В результате в пробирке образуется вещество хлоргематин, коричневого цвета.

Определить содержание преобразованного гемоглобина можно по интенсивности окраса полученной смеси. Для этого раствор разбавляется дистиллированной водой, пока его оттенок не станет идентичным веществу в контрольной запаянной пробирке.

Гемометр Сали для определения уровня гемоглобина

Чтобы упростить проведение лабораторного анализа был разработан гемометр Сали, который включает:

• штатив с 3 вертикальными гнездами;
• 2 запаянные пробирки со стандартными жидкостями;
• открытую градуированную пробирку;
• капилляр (0,2 мл);
• пипетку для воды;
• стеклянную палочку для перемешивания.

В стандартном растворе содержится норма в 167 г/л. После разбавления препарата крови, смешанного с кислотой, дистиллированной водой, достаточно сравнить разницу в объеме жидкости, чтобы высчитать уровень гемоглобина у пациента по методу Сали.

Методика проведения анализа

Для определения содержания гемоглобина в крови  лаборант наливает в пробирку 0,1% раствор соляной кислоты до нижней круговой отметки. Затем из пальца пациента забирается 0,04 мл крови и добавляется под прозрачный кислотный слой. Содержимое перемешивается и отставляется на четверть часа. Это время необходимо, чтобы гемоглобин преобразовался в хлоргематин.

По истечении 15 минут лаборант сравнивает цвет с контрольной пробиркой. Если у пациента не наблюдается анемии 3 степени, то полученный раствор окажется темнее. Затем с помощью пипетки по каплям добавляется дистиллированная вода. Каждый раз раствор перемешивается стеклянной палочкой.

Как только цвет сравняется, остается посмотреть на уровень жидкости по нижнему мениску. Учитывая, что стандартная пробирка гемометра Сали градуирована в г/%, для получения стандартной величины в г/л необходимо результат умножить на 10.

Недостатки метода Сали

Этот способ определения количества гемоглобина в крови не получил распространения в странах СНГ. У него есть несколько серьезных недостатков:

1. Время. На изучение крови 1 пациента затрачивается не менее 20 минут. При этом использование автоматизированных систем позволяет получить результат за несколько секунд.
2. Субъективность. Хроматическая методика Сали тесно связана с индивидуальным восприятием цвета. Соответственно, результаты могут различаться даже у 1 лаборанта в зависимости от внешних факторов.
3. Точность. Стандартная погрешность метода — 3 г/л. При использовании старых образцов контрольных пробирок, высоком содержании билирубина в крови и при плохом освещении результат определения уровня гемоглобина может отличаться еще больше, вплоть до 30% от реальных показателей.

При заболеваниях, связанных с изменением уровня гемоглобина в крови метод Сали не может использоваться из-за низкой точности, что и привело к его низкой популярности и постепенному превращению исключительно в практическую тренировку для студентов-медиков.

Метод Сали может эффективно использоваться для обучения медиков работе с лабораторным оборудованием. Он подходит для практической демонстрации различий между “старыми” и современными способами проведения диагностических исследований. Однако практическое использование хроматического метода в медицине очень ограничено из-за его низкой эффективности и высокой погрешности при интерпретации результатов.